产品货号：
BTN13-87810
中文名称：
人类嗜T淋巴细胞病毒1型(HTLV-1)RT-PCR试剂盒
英文名称：
Human T-cell Lymphoma Virus 1 RT-PCR Kit
产品规格：
50次
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本产品是专门检测HTLV-I的常规RT-PCR试剂盒。
人类嗜T淋巴细胞病毒1型(Human T-lymphotropic Virus 1，HTLV 1)主要感染人CD4+T淋巴细胞，可引起成人T淋巴细胞白血病/淋巴瘤、HTLV相关脊髓病(HTLV-I associated myelopathy，HAM/热带痉挛性下肢瘫，tropical spastic paraparesis TSP)及色素层炎。它主要通过输血、针头、性行为、母子传染，因此灵敏快捷地检测HTLV-I具有重要的意义。
保存：-20℃，有效期一年。
一、样品RNA的制备
二、RT-PCR反应(20μL体系)
三、电泳分析
相关搜索：人类嗜T淋巴细胞病毒1型(HTLV-1)RT-PCR试剂盒，Human T-cell Lymphoma Virus 1 RT-PCR Kit
人类嗜T淋巴细胞病毒1型(Human T-lymphotropic Virus 1，HTLV 1)主要感染人CD4+T淋巴细胞，可引起成人T淋巴细胞白血病/淋巴瘤、HTLV相关脊髓病(HTLV-I associated myelopathy，HAM/热带痉挛性下肢瘫，tropical spastic paraparesis TSP)及色素层炎。它主要通过输血、针头、性行为、母子传染，因此灵敏快捷地检测HTLV-I具有重要的意义。
- 即开即用，用户只需要提供样品RNA模板。
- 产品经过精心优化，分析灵敏性能到达100拷贝/反应。
- 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
- 特异性高，引物是根据人类嗜T淋巴细胞病毒1型RNA高度保守区设计，只能检测人类嗜T淋巴细胞病毒1型，不会跟除此之外的其他生物的RNA发生交叉反应。
- 本产品足够50次20μL体系的RT-PCR反应。
- 本产品只能用于定性实验，不能用于定量实验。
- 本产品只能用于科研。
| 组分 | 规格 |
| 2×RT-PCR Buffer | 500μL |
| 10×RT-PCR酶混合液 | 50μL |
| 超纯水 | 1mL |
| 人类嗜T淋巴细胞病毒1型RT-PCR引物混合液 | 100μL |
| 人类嗜T淋巴细胞病毒1型RT-PCR阳性对照(1×104拷贝/μL) | 250μL |
保存：-20℃，有效期一年。
一、样品RNA的制备
- 如果有N个样品，必须设置N+2个提取反应，多出的两个中一个是PC(样品制备阳性对照)，一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL试剂盒提供的RT-PCR阳性对照(1×104拷贝/μL)再加上一定量的水作为制备的阳性对照，加水后其总体积跟核酸纯化试剂盒所要求的起始样品体积一样。可以用水作为制备的阴性对照。
- 用自选方法纯化上述N+2个样品的RNA。本试剂盒跟市场上大多数样品RNA提取试剂盒兼容，也可以选用本公司的相关的核酸提取试剂盒。
二、RT-PCR反应(20μL体系)
- 标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的RNA样品，额外增加的两个管一个用于RT-PCR阳性对照，另一个用于RT-PCR阴性对照。按照下表在各PCR管中加入下列成分：
成分 N+2个
样品管RT-PCR
阴性对照RT-PCR
阳性对照2×RT-PCR Buffer 各10μL 10μL 10μL 10×RT-PCR酶混合液 各1μL 1μL 1μL 人类嗜T淋巴细胞病毒1型RT-PCR引物混合液 各2μL 2μL 2μL 制备的N+2个RNA样品 各7μL 不加 不加 超纯水 不加 7μL 不加 人类嗜T淋巴细胞病毒1型RT-PCR阳性对照(1×104拷贝/μL) 不加 不加 7μL - 上机进行RT-PCR，RT-PCR反应参数为:
过程 温度 时间 逆转录 42℃ 55分钟 预变性 95℃ 5分钟 PCR反应
(30个循环)95℃ 15秒 55℃ 60秒 65℃ 60秒 延伸 72℃ 10分钟
三、电泳分析
- 取10μL扩增产物进行常规琼脂糖电泳，检测扩增效果，由于扩增产物较短，建议用1.5%～2.0%的琼脂糖凝胶。
- 阳性样品预期得到的扩增产物长度为110bp。如果两个阴性对照(样品制备阴性对照或RT-PCR阴性对照)有此扩增产物，说明环境污染，则整个实验无效，不需要分析实验结果。
- 如果所有样品和RT-PCR阳性对照均无此扩增产物，则说明有系统性的问题(试剂，设备，程序，操作等)，需要重复并排查原因。
- 如果没有上述两种情况，则实验有效，可以分析样品的扩增结果。N+2个样品中扩增产物的判断为阳性，无则判定为阴性。
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